生物学论文_5-氮胞苷联合骨形态发生蛋白2诱导
文章目录
文题释义：
0引言Introduction
1 材料和方法Materials and methods
1.1 设计
1.2 时间及地点
1.3 材料
1.3.1 实验动物
1.3.2 实验试剂和仪器
1.4 实验方法
1.4.1 大鼠骨髓间充质干细胞的分离与培养
1.4.2 大鼠骨髓间充质干细胞的表面抗原鉴定
1.4.3 大鼠骨髓间充质干细胞诱导分化
1.4.4 免疫细胞化学法检测cTnI的表达
1.4.5 免疫荧光化学法检测cTnT、Desmin的表达
1.4.6 Western blot检测c TnT、cTnI的表达
1.4.7 RT-qPCR法检测GATA-4、Nkx2.5 mRNA表达
1.5 主要观察指标
1.6 统计学分析
2 结果Results
2.1 骨髓间充质干细胞形态
2.2 大鼠骨髓间充质干细胞的表面抗原鉴定结果
2.3 免疫细胞化学法和免疫荧光细胞化学法检测结果
2.4 Western blot检测结果
2.5 RT-qPCR检测结果
2.6 生物相容性
3 讨论Discussion
文章摘要:背景:干细胞已成为组织工程中理想的种子细胞,为细胞移植治疗心肌梗死提供了研究方向。目的:探讨骨形态发生蛋白2联合5-氮胞苷体外诱导骨髓间充质干细胞向心肌样细胞分化的可行性。方法:采用全骨髓贴壁法培养骨髓间充质干细胞,将第3代骨髓间充质干细胞进行分组诱导,分别为对照组（普通IMDM培养基）、骨形态发生蛋白2组（200 ng/L）、5-氮胞苷组（10μmol/L）、5-氮胞苷+骨形态发生蛋白2组。诱导3 d后更换正常培养基继续培养4周,免疫细胞化学法检测cTnI的表达,免疫荧光化学法检测Desmin、cTnT的表达,Western blot检测cTnT和cTnI的表达;诱导3 d后更换正常培养基继续培养1,2,4周,采用RT-qPCR检测心肌早期转录因子GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达。结果与结论:（1）Western blot检测诱导组均表达cTnT、cTnI,联合诱导组cTnT、cTnI的表达高于单独诱导组（P <0.01）;（2）免疫细胞化学法检测诱导组cTnI均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组（P <0.05）;免疫荧光细胞化学法检测诱导组Desmin、cTnT均呈阳性表达,联合诱导组高于单独诱导组（P <0.05）;（3）RT-qPCR检测诱导组均有GATA-4、Nkx2.5 mRNA的表达,联合诱导组高于单独诱导组（P <0.05）;（4）结果表明,骨髓间充质干细胞经5-氮胞苷和骨形态发生蛋白2联合诱导后可以提高心肌样细胞的分化效率。
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