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化学进展

吖啶酯化学发光分析中链霉亲和素的作用

吖啶酯化学发光分析CLIA是目前市场前景非常好的免疫分析方法,管式化学发光磁珠法中通常会用到链霉亲和素和生物素,这里介绍CLIA中链霉亲和素其作用。

吖啶酯的化学发光与鲁米诺不一样,鲁米诺是长光型,可长时间发光,而吖啶酯属于闪光性,发光时间短发光迅速,通常只有数秒。吖啶酯体系在碱性条件下加入激发剂过氧化氢0.4s后发射光强度达到最大,半衰期为0.9s,2s内发光基本结束,可以实现快速检测。吖啶酯与链霉亲和素结合后,可使其拥有更好的性能。

链霉亲和素在吖啶酯发光中的放大作用:

链霉亲和素是由链霉菌分泌的一种蛋白质,它能与生物素发生特异性结合,它们之间的结合力是目前已知的最强的非共价键结合力。因为这一特性,链霉亲和素-生物素反应体系在纯化和检测领域得到了广泛的应用。链霉亲和素以同源四聚体的形式存在,每摩尔的四聚体分子可结合4摩尔的生物素分子,所以在免疫检测领域具有信号放大作用。

吖啶酯化学发光、链霉亲和素磁珠-生物素放大反应体系包括:吖啶酯标记的抗体或抗原、生物素标记的抗体或抗原、链霉亲和素包被带有羧基或者Tosyl(对甲苯磺酰基)官能团的磁珠;所述的磁珠粒径0.1-5μm。由于生物素和链霉亲和素是以4:1的比例像结合,所以吖啶酯-生物素-抗原抗体复合物也是以4倍的比例与链霉亲和素结合,这样发光信号也扩大了4倍,检测灵敏度更高。

吖啶酯的化学发光免疫分析技术本身的灵敏度和特异性就非常高,引入了特异性结合的链霉亲和素-生物素系统后,放大了检测信号,使吖啶酯的CLIA有了更好的实用性。

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